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如何才能用好安捷倫色譜柱這件事確實值得好好學習

瀏覽次數☁▩:384釋出日期☁▩:2022-07-21
  安捷倫色譜柱的正確使用和維護非常重要☁·✘,稍有不慎就會降低色譜柱效率☁·✘,縮短使用壽命☁·✘,甚至損壞色譜柱₪•↟。在色譜操作過程中☁·✘,為了維護色譜柱☁·✘,需要注意以下幾個問題₪•↟。
  
  1✘₪✘•、避免壓力和溫度的急劇變化以及任何機械振動₪•↟。溫度的突然變化或色譜柱從高處墜落都會影響柱內的填充情況;柱壓的突然升高或降低也會對柱內的填料產生衝擊☁·✘,因此應緩慢調節流速☁·✘,進樣時閥門轉動不宜過慢₪•↟。
  
  2✘₪✘•、溶劑的組成應逐漸改變☁·✘,尤其是反相色譜₪•↟。不應直接由有機溶劑改為全水☁·✘,反之亦然₪•↟。
  
  3✘₪✘•、一般來說☁·✘,色譜柱不能反衝₪•↟。只有在生產廠家表明可以反衝的情況下☁·✘,才能透過反衝去除殘留在柱頭的雜質₪•↟。否則☁·✘,反衝會迅速降低柱效₪•↟。
  
  4✘₪✘•、選擇使用合適的流動相(尤其是pH)☁·✘,避免破壞固定相₪•↟。有時可以在進樣器前面連線一個預柱₪•↟。分析柱為鍵合矽膠時☁·✘,前置柱為矽膠☁·✘,可以使流動相在進入分析柱前被矽膠“飽和”☁·✘,避免矽膠基質在分析柱中溶解₪•↟。
 
  

安捷倫色譜柱
 

 

  5✘₪✘•、避免將基質複雜的樣品☁·✘,尤其是生物樣品直接注入色譜柱₪•↟。需要對樣品進行預處理或在進樣器和色譜柱之間連線保護柱₪•↟。保護柱通常是填充有類似固定相的短柱₪•↟。保護柱可以而且應該經常更換₪•↟。
  
  6✘₪✘•、經常用強溶劑清洗色譜柱☁·✘,以除去柱內殘留的雜質₪•↟。清洗時☁·✘,對流路徑系統中流動相的更換應逐漸用可混溶的溶劑轉移☁·✘,每個流動相的體積應為柱體積的20倍左右☁·✘,即常規分析需要50~75ml₪•↟。
  
  7✘₪✘•、色譜柱存放時☁·✘,用乙腈或甲醇填充色譜柱☁·✘,並擰緊色譜柱接頭☁·✘,防止溶劑揮發乾燥₪•↟。不要將緩衝溶液留在柱子中過夜或更長時間₪•↟。
  
  8✘₪✘•、色譜柱在使用過程中☁·✘,如果壓力升高☁·✘,一種可能是燒結過濾器堵塞₪•↟。此時應更換或拆下過濾器進行清洗;另一種可能是大分子進入柱子☁·✘,汙染柱頭;如果柱效降低或色譜峰變形☁·✘,柱頭可能會塌陷☁·✘,死體積可能會增加₪•↟。
  
  一般安捷倫色譜柱在正確使用的情況下☁·✘,使用壽命可達2年以上₪•↟。矽膠基填料只能在ph2~9範圍內使用₪•↟。柱子使用一段時間後☁·✘,一些吸附力強的物質可能會殘留在柱子頂部☁·✘,尤其是一些有色物質更容易被看到吸附在柱子頂部的填料上₪•↟。新色譜柱使用一段時間後☁·✘,柱頂填料可能會塌陷☁·✘,降低柱效₪•↟。這時也可以加入填料來恢復柱效₪•↟。
  
  安捷倫色譜柱每次工作後☁·✘,最好用洗脫能力強的洗脫液清洗₪•↟。例如☁·✘,ODS柱應用甲醇清洗至基線平衡₪•↟。當使用鹽緩衝溶液作為流動相時☁·✘,應在使用後用無鹽流動相清洗₪•↟。含有鹵素(氟✘₪✘•、氯✘₪✘•、溴)的化合物可能會腐蝕不鏽鋼管道☁·✘,不應長時間接觸₪•↟。如果安裝在HPLC儀器上的色譜柱不經常使用☁·✘,應每4-5天開啟並清洗15分鐘₪•↟。
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